目的 探討去甲斑蝥素(NCTD)對荷瘤裸鼠膽囊癌移植瘤的生長的抑制作用及其可能機制。 方法 在培養人膽囊癌 GBC-SD 細胞的基礎上建立荷瘤裸鼠膽囊癌模型,應用NCTD對該動物模型進行移植瘤增殖、生長的抑制實驗,實驗分為空白對照、5-FU、NCTD、NCTD+5-FU 4 組;觀測荷瘤鼠移植瘤大小、生長曲線和抑瘤率,應用流式細胞術、光學和電子顯微鏡、免疫組化技術觀測移植瘤細胞的細胞周期、凋亡率、形態學改變和PCNA、Ki-67、Cyclin D1、p27基因蛋白表達。 結果 ① NCTD 對荷瘤鼠的半數致死量 (LD 50) 為 139.96 mg/kg,應用 1/5 LD 50 即可使裸鼠移植瘤明顯變小 [(5.61±0.39) vs. (9.78±0.61)cm3,P <0.05 ) ],抑瘤率上升( 42.63% );與 5-F U 合用時上述作用更明顯。 ② 經NCTD作用后的裸鼠移植瘤細胞,流式細胞術示S期細胞減少、細胞凋亡率上升;光鏡檢查見細胞核固縮,核碎裂等現象;電鏡顯示微絨毛卷縮蜷縮、斷裂、高爾基體、線粒體等細胞器衰退,可見典型的凋亡細胞及被巨噬細胞吞噬的凋亡小體。 ③ 免疫組化檢測顯示,NCTD 組 PCNA、Ki-67、cyclin D1 表達下降,p27 表達上升,與 5-FU 聯合應用時作用明顯。 結論 NCTD 可明顯抑制荷瘤裸鼠膽囊癌移植瘤的增殖和生長,若與 5-FU 合用則呈協同效應以加強其抗癌作用;其機制可能與NCTD干擾 荷瘤鼠膽囊癌移植瘤細胞周期,抑制細胞增殖,誘導細胞凋亡,以及改變細胞增殖、細胞周期調控相關基因蛋白表達有關。
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